គន្លឹះមូលដ្ឋានគ្រឹះសម្រាប់ការធ្វើឱ្យការធ្វើឱ្យមានភាពតានតឹងនៃវប្បធម៌កោសិកា

គន្លឹះមូលដ្ឋានគ្រឹះសម្រាប់ការធ្វើឱ្យការធ្វើឱ្យមានភាពតានតឹងនៃវប្បធម៌កោសិកា

កោសិកាបន្តការរំលាយអាហាររបស់ពួកគេក្នុងកំឡុងពេលសកម្មភាពកំណើនសេដ្ឋកិច្ចធម្មតាដែលទាមទារឱ្យមានការចូលរួមពីការយោគយល់ផ្សេងៗ។ នៅពេលសីតុណ្ហភាពធ្លាក់ចុះទាបជាង -70 អង្សាសេហ្វអេសអេសឈប់ធ្វើការ។ ដូច្នេះនៅក្នុងបរិយាកាសដែលមានសីតុណ្ហភាពទាបបំផុតកោសិកាអាចបញ្ឈប់សកម្មភាពមេតាប៉ូលីសរបស់ពួកគេហើយបញ្ចូលរដ្ឋអសកម្មដែលអនុញ្ញាតឱ្យរក្សាទុករយៈពេលវែង។

1. សំភារៈពិសោធន៍

សម្ភារៈមូលដ្ឋាន:

ឧបករណ៍ផ្ទុកវប្បធម៌មូលដ្ឋាន

សេរ៉ូម (FBS ធម្មតា / NBS)

ការងារ ultrapure នេះ

iltheyl sulfoxide (DMSO)

ដំណោះស្រាយអំបិលគ្រឿងសំរុប PHOSPHATE Phosphate Phosphate Phosphate

កាំភ្លើងបំពង់បង្ហូរទឹក

កាំភ្លើងបំពង់បង្ហូរអគ្គិសនី

ការរៀបចំការពិសោធន៍

ក) ការរៀបចំដំណោះស្រាយត្រជាក់:

កោសិកាទូទៅ: 55% មធ្យម + 40% សេរ៉ូម bovine (FBS / NBS) + 5% DMSO

កោសិកាសំខាន់: 90% សេរ៉ូម bovine (FBS / NBS) + 10% DMSO

ក្រៅពីដំណោះស្រាយ Cryopop ដែលបានរៀបចំចូលក្នុងបំពង់សេនធ័រ 15 ម។ ល [សំបុក] និងរក្សាទុកនៅ 4 អង្សាសេសម្រាប់ការប្រើប្រាស់នៅពេលក្រោយ។

(ខ) ការរៀបចំកោសិកាដែលត្រូវកកៈ

មុនពេលត្រជាក់ក្រឡាសូមជ្រើសរើសក្រឡាដែលមានស្ថានភាពរីកចម្រើនល្អនិងក្នុងដំណាក់កាលលូតលាស់លោការីតនិងជំនួសពួកវាដោយមានឧបករណ៍ផ្ទុកស្រស់ 12-24 ម៉ោងមុនពេលត្រជាក់ដើម្បីរក្សាលក្ខខណ្ឌកោសិកា។

នីតិវិធីពិសោធន៍

1. សង្កេតមើលដង់ស៊ីតេនៃកោសិកាដែលត្រូវកកដែលមានប្រហែល 80% ~ 90% ។ ប្រើកាំភ្លើង Pipette មួយដើម្បីបំពេញបន្ថែមឧបករណ៍ផ្ទុកចាស់បន្ថែម PBS ដែលគ្មានមេរោគដើម្បីលាងសមាតកោសិកា 1-2 ដងហើយយកឧបករណ៍ផ្ទុកដែលនៅសល់ក្នុងបរិយាកាសវប្បធម៌។

2. បន្ថែមចំនួនទឹកប្រាក់សមស្របនៃទឹកដែលសមស្របនៃទឹកភ្លៅឬទឹករំលាយអាហារដើម្បីអនុញ្ញាតឱ្យ trypsin បញ្ចូលក្រឡាហើយដាក់វានៅក្នុងកន្លែងភ្ញាស់សម្រាប់ការរំលាយអាហារ។ សង្កេតលក្ខខណ្ឌនៃកោសិកានៅក្រោមមីក្រូទស្សន៍: ស៊ីតូប៉ូសកំពុងដកថយហើយកោសិកាលែងភ្ជាប់ទៅនឹងសន្លឹកទៀតហើយ។ នៅចំណុចនេះបន្ថែមដំណោះស្រាយបញ្ឈប់ដើម្បីបញ្ឈប់ដំណើរការរំលាយអាហារ។

3. ពពុះកោសិកាដោយថ្នមៗជាមួយនឹងព័ត៌មានជំនួយមួយដើម្បីបង្កើតការព្យួរក្រឡានិងសេនសេហៀរនៅ 1000 រូប្លិមសម្រាប់ 3-5 នាទី។

បោះបង់ភាពអត់ធ្មត់បន្ថែមបន្ថែមចំនួនទឹកប្រាក់សមរម្យនៃដំណោះស្រាយត្រជាក់និង pipette ថ្នមៗដើម្បីឱ្យកោសិការាប់ស្មើនឹងគ្នា។ លៃតម្រូវដង់ស៊ីតេកោសិកាជាមួយនឹងឧបករណ៍ផ្ទុក Cryopress ដើម្បីធ្វើឱ្យដង់ស៊ីតេចុងក្រោយ 5 × 106 / ML ~ 1 × 10 × 107 / ML ។

4. ប្រើកាំភ្លើងបំពង់មួយដើម្បីបំបែកបំពង់ Cryogenic យោងទៅតាមសមត្ថភាពដែលរំពឹងទុកហើយប្រើម៉ាស៊ីន Capping ដោយស្វ័យប្រវត្តិដើម្បី Cap និង Sear ។

5. កម្មវិធី CreoPresresresaces ស្តង់ដារគឺជាអត្រាត្រជាក់ -1 អង្សាសេទៅ -2 អង្សាសេនិងកោសិកាដែលត្រូវកកអាចត្រូវបានកកបន្តិចម្តង ៗ យោងទៅតាមជំហានខាងក្រោម: សីតុណ្ហភាពបន្ទប់→ 4 នាទី) → - 20 អង្សាសេ (30 នាទី) → -80 អង្សាសេ (មួយយប់) →ការផ្ទុករយៈពេលវែងក្នុងអាសូតរាវ។

វាក៏អាចត្រូវបានរក្សាទុកដោយផ្ទាល់នៅក្នុងម៉ាសីនតឹកកកនៅ -80 អង្សាសេពេញមួយយប់ហើយបន្ទាប់មកផ្ទេរទៅអាសូតរាវសម្រាប់ផ្ទុក។

ក្រុមហ៊ុន Yongyue វេជ្ជសាស្ត្រគឺជាសហគ្រាសបច្ចេកវិទ្យាខ្ពស់ដែលមានឯកទេសខាង R & D, ផលិតកម្មផលិតកម្មនិងការលក់ឧបករណ៍ប្រើប្រាស់ជីវម៉ាស។ ព័ត៌មានជំនួយ Pipette, បំពង់, បំពង់, ចាន PCR, ផលិតផលវប្បធម៌វប្បធម៌និងមន្ទីរពិសោធន៍ជីវសាស្ត្រជីវសាស្រ្តផ្សេងទៀត។ យូយ៉ុងវេជ្ជសាស្ត្រគឺសក្ដិសមនៃការជឿទុកចិត្តនិងជម្រើសរបស់អ្នក! សូមស្វាគមន៍មកកាន់ពិគ្រោះយោបល់!